染色体分析

　　染色体分析

主要分析染色体数目和结构的变化。特异性染色体核型异常分析是诊断白细胞相关肿瘤的重要手段。急性髓细胞白血病多出现染色体核型异常，一类为平衡性畸变，表现为易位或倒位，产生融合基因；另一类为不平衡畸变，表现为染色体整条或部分增加或丢失，常见+8、-5／del（5q）、-7／del（7q）等。急性淋巴细胞白血病多出现特异性染色体重排的克隆性核型异常及以超二倍体、亚二倍体多见的染色体数目异常等。近年来，进行染色体分析的技术发展较快，方法也越来越多。

（一）染色体核型分析

核型分析包括非显带染色体核型分析和显带染色体核型分析两类，前者主要用于检测染色体数目，是显带核型分析的基础，但不能将每条染色体本身的特征完全显示出来；后者用于检测染色体结构，包括G显带、R显带、T显带、C显带和N显带等。G显带在临床上常用，对整条染色体的显带较为清晰。R显带在临床上也较常用，R显带比较容易识别染色体末端易位与缺失，常用于鉴定染色体的变异。T显带可使染色体末端区域深染。C显带可使着丝粒和次级缢痕深染。N显带可使染色体的随体及核仁形成区着色。显带技术常规显示320～554条带纹，而近来发展起来的细胞遗传学技术，其分辨率较高，可显示出843～1256条带纹，更适用于遗传性疾病的诊断及肿瘤等疾病方面的研究。详见第十九章第二节。

　（二）荧光原位杂交技术

突光原位杂交技术（fluorescent in situ hybridization，FISH）是在传统细胞遗传学基础上，按照碱基互补原则，用荧光标记的核酸探针与细胞内的核酸序列进行特异性结合形成杂交双链DNA，借助荧光显微镜在细胞或组织中观察荧光探针信号，对靶点上基因状态的定性、定量和定位分析。FISH技术弥补了传统细胞遗传学对间期细胞、复杂核型细胞和染色体微缺失无法检测等方面的不足。图1-2／文末彩图1-2显示了采用FISH技术检出的慢性淋巴细胞白血病中MYC基因重排。

   目前常用于血液肿瘤中的FISH技术有以下几种：非变性探针FISH、断裂点探针FISH、双色荧光FISH及单色荧光FISH等，其中，非变性探针FISH最常用，单色荧光FISH较早用于检测染色体的相互易位。在FISH基础上，光谱核型分析（spectral karyotyping，SKY）、多色FISH、彩色显带FISH等技术提高了染色体分析能力。

   （三）比较基因组杂交技术

比较基因组杂交技术（comparative genomic hybridization，CGH）是采用不同荧光素标记分离正常和肿瘤组织中的全部DNA，与待测染色体杂交，根据染色变化判断肿瘤组织中扩增序列的基因表达情况。与FISH相比，CGH可在全基因组水平对肿瘤分子细胞遗传学异常进行检测，并可描绘出相应的CGH核型图，比较分析不同来源染色体的同源性。CGH不能检测出染色体平衡易位、基因突变以及较小的染色体DNA扩增和缺失。